Elektroforesis: untuk apa, untuk apa dan bagaimana melakukannya

Isi

• Untuk apa ini
• Bagaimana itu dilakukan
• Jenis elektroforesis
• 1. Elektroforesis hemoglobin
• 2. Elektroforesis protein

Elektroforesis adalah suatu teknik laboratorium yang dilakukan dengan tujuan untuk memisahkan molekul sesuai dengan ukuran dan muatan listriknya sehingga dapat ditegakkan diagnosis penyakit, ekspresi protein dapat diverifikasi, atau identifikasi mikroorganisme.

Elektroforesis adalah prosedur sederhana dan berbiaya rendah, digunakan dalam rutinitas laboratorium dan dalam proyek penelitian. Sesuai dengan tujuan elektroforesis, mungkin perlu dilakukan tes dan ujian lain untuk mencapai diagnosis, misalnya.

Untuk apa ini

Elektroforesis dapat dilakukan untuk tujuan yang berbeda, baik dalam proyek penelitian maupun dalam diagnosis, karena ini adalah teknik yang sederhana dan berbiaya rendah.Dengan demikian, elektroforesis dapat dilakukan untuk:

• Identifikasi virus, jamur, bakteri dan parasit, dengan aplikasi ini lebih umum dalam proyek penelitian;
• Tes garis ayah;
• Periksa ekspresi protein;
• Identifikasi mutasi, berguna dalam diagnosis leukemia, misalnya;
• Analisis jenis hemoglobin yang bersirkulasi, yang berguna dalam diagnosis anemia sel sabit;
• Kaji jumlah protein yang ada di dalam darah.

Sesuai dengan tujuan elektroforesis, mungkin perlu dilakukan tes pelengkap lainnya agar dokter dapat menyelesaikan diagnosis.

Bagaimana itu dilakukan

Untuk melakukan elektroforesis, diperlukan gel yang dapat berupa poliakrilamida atau agarosa tergantung pada tujuan, penyangga dan tong elektroforesis, penanda berat molekul dan pewarna fluoresen, selain peralatan lampu UV atau LED, juga dikenal sebagai transiluminator.

Setelah gel dibuat, benda tertentu harus ditempatkan sedemikian rupa sehingga sumur dibuat di dalam gel, yang populer disebut sisir, dan biarkan gel mengeras. Saat gel sudah siap, cukup oleskan bahan ke dalam sumur. Untuk itu, penanda berat molekul harus ditempatkan di salah satu sumur, kontrol positif, yaitu zat yang diketahui apa itu, kontrol negatif, yang menjamin validitas reaksi, dan sampel yang akan dianalisis. Semua sampel harus dicampur dengan pewarna fluoresen, karena cara ini memungkinkan untuk memvisualisasikan pita pada transiluminator.

Gel dengan sampel harus ditempatkan di tong elektroforesis yang berisi larutan buffer spesifik, kemudian perangkat dihidupkan sehingga ada arus listrik dan, akibatnya, beda potensial, yang penting untuk pemisahan partikel sesuai dengan masing-masing. beban dan ukuran. Waktu kerja elektroforesis bervariasi sesuai dengan tujuan prosedur, dan dapat bertahan hingga 1 jam.

Setelah waktu yang ditentukan, dimungkinkan untuk melihat hasil aliran elektroforetik melalui transiluminator. Ketika gel ditempatkan di bawah sinar UV atau LED, dimungkinkan untuk memvisualisasikan pola pita: semakin besar molekul, semakin kecil migrasi, semakin dekat ke sumur, sedangkan semakin ringan molekul, semakin besar potensi migrasi.

Untuk reaksi yang akan divalidasi, pita dari kontrol positif harus divisualisasikan dan tidak ada yang harus divisualisasikan dalam kontrol negatif, karena jika tidak maka ini merupakan indikasi adanya kontaminasi, dan seluruh proses harus diulang.

Jenis elektroforesis

Elektroforesis dapat dilakukan untuk berbagai tujuan dan sesuai dengan tujuannya, beberapa jenis gel dapat digunakan, yang paling umum adalah poliakrilamida dan agarosa.

Elektroforesis untuk mengidentifikasi mikroorganisme lebih umum dilakukan di laboratorium penelitian, namun untuk tujuan diagnostik, elektroforesis dapat digunakan untuk mengidentifikasi penyakit hematologi dan penyakit yang berkembang seiring dengan peningkatan jumlah protein, menjadi jenis utama elektroforesis:

1. Elektroforesis hemoglobin

Elektroforesis hemoglobin adalah teknik laboratorium yang dilakukan untuk mengidentifikasi berbagai jenis hemoglobin yang beredar di dalam darah, sehingga memungkinkan untuk mengidentifikasi adanya penyakit yang berkaitan dengan sintesis hemoglobin. Jenis hemoglobin diidentifikasi melalui elektroforesis pada pH tertentu, idealnya antara 8,0 dan 9,0, dengan pola pita yang dapat dibandingkan dengan pola normal, sehingga memungkinkan identifikasi hemoglobin yang abnormal.

Untuk apa itu dibuat: Elektroforesis hemoglobin dilakukan untuk menyelidiki dan mendiagnosis penyakit yang berkaitan dengan sintesis hemoglobin, seperti anemia sel sabit dan penyakit hemoglobin C, selain berguna dalam membedakan talasemia. Pelajari cara menafsirkan elektroforesis hemoglobin.

2. Elektroforesis protein

Elektroforesis protein adalah pemeriksaan yang diminta oleh dokter untuk menilai jumlah protein yang beredar di dalam darah dan, dengan demikian, untuk mengidentifikasi penyakit. Pemeriksaan ini dilakukan dari sampel darah, yang disentrifugasi untuk mendapatkan plasma, bagian darah yang antara lain mengandung protein.

Setelah elektroforesis, pola pita dapat divisualisasikan dan, selanjutnya, grafik di mana kuantitas setiap fraksi protein ditunjukkan, menjadi dasar diagnosis.

Untuk apa itu dibuat: Elektroforesis protein memungkinkan dokter untuk menyelidiki terjadinya multiple myeloma, dehidrasi, sirosis, peradangan, penyakit hati, pankreatitis, lupus dan hipertensi sesuai dengan pola pita dan grafik yang disajikan dalam laporan pemeriksaan.

Pahami cara melakukannya dan cara memahami hasil elektroforesis protein.